微生物限度檢查法（2005年版一部）
附錄ⅩⅢC. 微生物限度檢查法
微生物限度檢查法系檢查非規定**制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項目包括**數、霉菌素、酵母菌數及控制菌檢查。
微生物限度檢查應在環境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區域內進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。單向流空氣區域、工作臺面及環境應定期按《醫藥工業潔凈室（區）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現行國家標準進行潔凈度驗證。
供試品檢查時，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應證明其有效性及對微生物的生長和存活無影響。
除另有規定外，本檢查法中**培養溫度為30～35℃，霉菌、酵母菌培養溫度為25～28℃，控制菌培養溫度為36℃±1℃。
檢驗結果的報告以1g、1ml、10g、10ml或10cm<2>為單位報告。
檢驗量
檢驗量即一次試驗所用的供試品（g、ml 或 cm<2>）。
除另有規定外，一般供試品的檢驗量為10g或10ml；中藥膜劑為50cm<2>；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗應增加10g或10ml。
檢驗時，應從2個以上*小包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，
膜劑還不得少于4片。
一般應隨機抽取不少于檢驗用量（兩個以上*小包裝單位）的3倍量供試品。
供試液的制備
根據供試品的理化特性與生物學特性，可采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需用水浴加溫時，溫度不應超過45℃。供試液從制備至加入檢驗用培養基，不得超過1小時。
除另有規定外，常用的供試液制備方法如下。
1.液體供試品
取供試品10ml，加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，混勻，作為1：10的供試液。油劑可加入適量的無菌聚山梨酯80使供試品分散均勻。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。
2.固體、半固體或黏稠性供試品
取供試品10g，加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1：10的供試液。必要時加適量的無菌聚山梨酯80，并置水浴中適當加溫使供試品分散均勻。
3.需用特殊供試液制備方法的供試品
(1)非水溶性供試品
方法1 取供試品5g(5ml),加入含溶化的（溫度不超過45℃）5g司盤80、3g單硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80無菌混合物的燒杯中，用無菌玻棒攪拌成團后，慢慢加入45℃左右的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，邊加邊攪拌，使供試品充分乳化，作為1:20的供試液。
方法2 取供試品10g，加至含20ml無菌十四烷酸異丙酯（制法見附錄XIII B無菌檢查法中供試品的無菌檢查項下）和無菌玻璃珠的適宜容器中 ，必要時可增加十四烷酸異丙酯的用量，充分振搖，使供試品溶解。然后加入45℃的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液100ml，振搖5~10分鐘，萃取，靜置使油水明顯分層，取其水層作為1：10的供試液。
（2）膜劑供試品
取供試品100cm2，剪碎，加50ml或100ml的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液（必要時可增加稀釋液），浸泡，振搖，作為1：10或1：20的供試液。
(3)腸溶及結腸溶制劑供試品
取供試品10g ，加pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液(用于腸溶制劑)PH7.6無菌磷酸鹽緩沖液（用于結腸溶制劑）至100ml，置45℃水浴中，振搖，使溶解，作為1：10的供試液。
（4）氣霧劑、噴霧劑供試品
取規定量供試品，置冰凍室冷凍約1小時，取出，迅速**供試品開啟部位，用無菌鋼錐在該部位鉆一小孔，放至室溫，并輕輕轉動容器，使拋射劑緩緩全部釋出。用無菌注射器吸出全部藥液，加至適量的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液（若含非水溶性成分，加適量的無菌聚山梨酯80）中，混勻，取相當于10g或10ml的供試品，再稀釋成1：10的供試液。
（5）具抑菌活性的供試品
當供試品有抑菌活性時，應消除供試液的抑菌活性后，再依法檢查。常用的方法如下。
①培養基稀釋法 取規定量的供試液，至較大量的培養基中，使單位體積內的供試品含量減少，至不含抑菌作用。測定**、霉菌及酵母菌的菌數時，取同稀釋級的供試液2ml，每1ml供試液可等量分注多個平皿，傾注瓊脂培養基，混勻，凝固，培養，計數。每1ml供試液所注的平皿中生長的菌數之和即為1ml的菌落數，計算每1ml供試液的平均菌落數，按平皿法計數規則報告菌數；控制菌檢查時，可加大增菌培養基的用量。
②離心沉淀集菌法 取一定量的供試液，3000轉/分離心20分鐘（供試液如有沉淀，先以500轉/分離心5分鐘，取全部上清液再離心），棄去上清液，留底部集菌液約2ml，加稀釋液補至原量。
③薄膜過濾法 見**、霉菌及酵母菌計數項下的“薄膜過濾法”。
④中和法 凡含汞、砷或防腐劑等具有抑菌作用的供試品，可用適宜的中和劑或滅活劑消除其抑菌成分。中和劑或滅活劑可加在所用的稀釋液或培養基中。
**、霉菌及酵母計數
計數方法的驗證
當建立藥品的微生物限度檢查法時，應進行**、霉菌及酵母菌計數方法的驗證，以確認所采用的方法適合于該藥品的**、霉菌及酵母菌數的測定。若藥品的組分或原檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時，計數方法應重新驗證。
驗證時，按供試液的制備和**、霉菌及酵母菌計數所規定的方法及下列要求進行。對各試驗菌的回收率應逐一進行驗證。
菌種 驗證試驗所用的菌株傳代次數不得超過5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代），并采用適宜的菌種保藏技術，以保證試驗菌株的生物學特性。
大腸埃希菌（Escherichia coli) ［CMCC（B）44 102］
金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)［CMCC（B） 26 003］
枯草芽孢桿菌 (Bacillus subtilis ) ［CMCC（B） 63 501］
白色*** (Candidaalbicans) [CMCC(F) 98 001]
黑曲霉 (Aspergillus niger ) [CMCC(F) 98 003]
菌液制備 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基或營養瓊脂培養基中，培養18~24小時；接種白色念株菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基或改良馬丁瓊脂培養基中，培養24~48小時。上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數為50~100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基中，培養5~7天，加入3~5ml0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，吸出孢子懸液（用管口帶有薄的無菌棉花或紗布能過濾菌絲的無菌毛細吸管）至無菌試管內，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數50~100cfu的孢子懸液。
驗證方法 驗證試驗至少應進行3次獨立的平行試驗，并分別計算各試驗菌每次試驗的回收率。
（1）試驗組 平皿法計數時，取試驗可能用的*低稀釋級供試液1ml 和50~100cfu試驗菌，分別注入平皿中，立即傾注瓊脂培養基，每株試驗菌平行制備2個平皿，按平皿法測定其菌數。薄膜過濾法計數時，取規定量試驗可能用的*低稀釋級供試液，過濾，沖洗，在*后一次的沖洗液中加入50~100cfu試驗菌，過慮，按薄膜過濾法測定其菌數。
（2）菌液組 測定所加的試驗菌數。
（3）供試品對照組 取規定量供試液，按菌 落計數方法測定供試品本底菌數。
（4）稀釋劑對照組 若供試液制備需要分散、乳化、中和、離心或薄膜過濾等特殊處理時，應增加稀釋劑對照組，以考察供試液制備過程中微生物受影響的程度。試驗時，可用相應的稀釋液替代供試品，加入試驗菌，使*終菌濃度為每1ml供試液含50~100cfu，按試驗組的供試液制備方法和菌落計數方法測定其菌數。
結果判斷 在3次獨立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率（稀釋劑對照組的平均菌落數占菌液組的平均菌落數的百分率）應均不低于70%。若試驗組的菌回收率（試驗組的平均菌落數減去供試品對照組的平均菌落數的值占菌液組的平均菌落數的百分率）均不低于70%，照該供試液制備方法和計數法測定供試品的**、霉菌及酵母菌數；若任一次試驗中試驗組的菌回收率低于70%，應采用培養基稀釋法、離心沉淀集菌法、薄膜過濾法、中和法等方法或聯合使用這些方法消除供試品的抑菌活性，并重新進行方法驗證。
驗證試驗也可與供試品的**、霉菌及酵母菌計數同時進行。
檢查法
計數方法包括平皿法和 薄膜過濾法。檢查時，按已驗證的計數方法進行供試品的**、霉菌及酵母菌菌數的測定。
取按驗證的方法制備的均勻供試液，用PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液稀釋成1：10、1：100、1：1000等稀釋級。
1.平皿法
采用平皿法進行菌數測定時，應取適宜的連續2~3個稀釋級的供試液。
取供試液1ml,置直徑90mm的無菌平皿中，注入15~20ml溫度不超過45℃的溶化的營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄瓊脂培養基，混勻，凝固，倒置培養。每稀釋級每種培養基至少制備2個平板。
陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，置無菌平皿中，注入培養基，凝固，倒置培養。每種計數的培養基各制備2個平板，均不得有菌生長。
培養和計數 除另有規定外，**培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；霉菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不小于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
一般營養瓊脂培養基用于**計數；玫瑰紅鈉瓊脂培養基用于霉菌及酵母菌計數；酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基用于酵母菌計數。在特殊情況下，若營養瓊脂培養基上長有霉菌和酵母菌、玫瑰紅鈉瓊脂培養基上長有**，則應分別點計霉菌和酵母菌、**菌落數。然后將營養瓊脂培養基上的霉菌和酵母菌數或玫瑰紅鈉瓊脂培養基上的**數，與玫瑰紅鈉瓊脂培養基中的霉菌和酵母菌數或營養瓊脂培養基中的**數進行比較，以菌落數較高的培養基中的菌數為計數結果。
含蜂蜜、王漿的液體制劑，用玫瑰紅鈉瓊脂培養基測定霉菌數，用酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基測定酵母菌數，合并計數。
菌數報告規則 宜選取**、酵母菌平均菌落數在30～300之間、霉菌宜平均菌落數在30～100之間的稀釋級，作為菌數報告（取兩位有效數字）的依據。
（1）當僅有1個稀釋級的菌落數符合上述規定，以該級的平均菌落數乘以稀釋倍數的值報告菌數。
（2）當同時有2個稀釋級的菌落數符合上述規定時，視兩者比值（比值為高稀釋級的菌落數乘以稀釋倍數的值除以低稀釋級的菌落數乘以稀釋倍數的值） 而定。若比值不大于2，以兩稀釋級的菌落數乘以稀釋倍數的均值報告菌數；若比值大于2但不超過5時，以低稀釋級的菌落乘以稀釋倍數的值報告菌數，當出現比值大于5，或高稀釋級的菌落數大于或等于低稀釋級的菌落數等異常情況時，應查明原因再行檢查，必要時，應進行方法的重新驗證。
（3）當各稀釋級的平均菌落數均小于30，以*低稀釋級的平均菌落數乘以稀釋倍數的值報告菌數。
（4）如各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅*低稀釋級的平板有菌落生長，但平均菌落數小于1小時，以＜1乘以*低稀釋倍數的值報告菌數。
2.薄膜過濾法
采用薄膜過濾法，濾膜孔徑不大于0.45um，直徑一般為50mm。選擇濾膜材質時應保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應采用適宜的方法**。使用時，應保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品，其濾膜和過濾器在使用前應充分干燥。為發揮濾膜的*大過濾效率，應注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個濾膜表面。供試液經薄膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml。每片濾膜的總過量不宜過大，以避免濾膜上的微生物受損傷。
取相當于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品沒1g或1ml所含的菌數較多時，可取適宜稀釋級的供試液1ml，過濾。用PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計數方法的驗證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
培養和計數 培養條件和計數方法同平皿法，每片濾膜上的菌 落數應超過100個。
菌數報告規則 以相當于1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌生長，以＜1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或＜1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
控制菌檢查
控制菌檢查方法的驗證。
當建立藥品的微生物限度檢查法時，應進行控制菌檢查方法的驗證，以確認所采用的方法適合于該藥品的控制菌檢查。若藥品的組分或原檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時，檢查方法應重新驗證。
驗證時，依各品種項下微生物限度標準中規定檢查的控制菌選擇相應驗證的菌株，驗證大腸菌群檢查法時，應采用大腸埃希菌作為驗證菌株。驗證試驗按供試液的制備和控制菌檢查法的規定及下列要求進行。
菌種 對試驗菌種的要求同**、霉菌及酵母菌計數方法的驗證。
大腸埃希菌（Escherichia coli) ［CMCC（B）44 102］
金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)［CMCC（B） 26 003］
乙型副傷寒沙門菌（Salmonella paratyphi B) ［CMCC（B）50 094］
銅綠假單胞菌 (Pseudomonas aeruginosa) ［CMCC（B） 10 104］
生孢梭菌 (Clostridiumsporogenes) [CMCC(B) 64 941]
菌液制備 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基或營養瓊脂培養基中，生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽流體培養基中，培養18~24小時。用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數 為10~100cfu的菌懸液。
驗證方法
（1）試驗組 取規定量供試液及10~100cfu試驗菌加入增菌培養基中，依相應控制菌檢查法進行檢查。當采用薄膜過濾法時，取規定量供試液，過濾，沖洗，試驗菌應加在*后一次沖洗液中，過濾后，注入增菌培養基或取出濾膜接入增菌培養基中。
（2）陰性菌對照組 設立陰性菌對照組是為了驗證該控制菌檢查方法的專屬性。方法同試驗組，驗證大腸埃希菌、大腸菌群、沙門菌檢查法時的陰性對照菌采用金黃色葡萄球菌；驗證銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌，梭菌檢查法時的陰性對照菌采用大腸埃希菌。陰性對照菌不得檢出。
結果判斷 陰性菌對照組不得檢出陰性對照菌。若試驗組檢出試驗菌，按此供試液制備法和控制菌檢查法進行供試品的該控制菌檢查；若試驗組未檢出試驗菌，應采用培養基稀釋法、離心沉淀集菌法、薄膜過濾法、中和法等方法或聯合使用這些方法消除供試品的抑菌活性，并重新進行方法驗證。
驗證試驗也可與供試品的控制菌檢查同時進行。
檢查法
供試品的控制菌檢查應按已驗證的方法進行，增菌培養基的實際用量同控制菌檢查方法的驗證。
陽性對照試驗 進行供試品控制菌檢查時，應做陽性對照試驗。陽性對照驗的加菌量為10~100cfu，方法同供試品的控制菌檢查。陽性對照試驗應檢出相應的控制菌。
陰性對照試驗 取稀釋液10ml照相應控制菌檢查法檢查，作為陰性對照。陰性對照應無菌生長。
（1）大腸埃希菌（Escherichia coli) 取供試液10ml（相當于供試品1g、1ml、10cm2），直接或處理后接種至適量（不少于100ml）的膽鹽乳糖培養基中，培養18~24小時，必要時可延長至48小時。
取上述培養物0.2ml，接種至含5mlMUG培養基的試管內，培養，于5小時、24小時在366nm紫外線下觀察，同時用未接種的MUG培養基作本底對照。若管內培養物呈現熒光，為MUG陽性，不呈現熒光，為MUG陰性。觀察后，沿培養管的管壁加入數滴靛基質試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質陽性；呈試劑本色，為靛基質陰性。本底對照應為MUG陰性和靛基質陰性。
如MUG陽性、靛基質陽性，判供試品檢出大腸埃希菌；如MUG陰性，靛基質陰性，判供試品未檢出大腸埃希菌；如MUG陽性、靛基質陰性，或MUG陰性、靛基質陽性，均應取膽鹽乳糖培養基的培養物劃線于曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基的平板上，培養18～24小時。
若平板上無菌落生長、或生長的菌落與表1所列的菌落形態特征不符，叛供試品未檢出大腸埃希菌。若平板上生長的菌落與表1所列的菌落形態特征相符或疑似，應進行分離、純化、染色鏡檢和適宜的生化試驗，確認是否為大腸埃希菌。
表1 大腸埃希菌菌落形態特征
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培養基 菌 落 形 態
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曙紅亞甲藍 呈紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色、菌落中心呈
瓊脂 深紫色或無明顯暗色中心、圓形，稍凸起，邊緣整齊，
表面光滑，濕潤，常有金屬光澤
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麥康凱瓊脂 鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色，圓形，扁平，
邊緣整齊，表面光滑，濕潤
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（2）大腸菌群（Coliform) 取含適量（不少于10ml）的膽鹽乳糖發酵培養基管3支，分別加入1：10的供試液1ml（含供試品0.1g或0.1ml）、1：100的供試液1ml （含供試品0.01g或 0.01ml ）、1：1000的供試液1ml（含供試品0.001g或0.001ml），另取1支膽鹽乳糖發酵培養基加入稀釋液1ml作為陰性對照管。培養18~24小時。
膽鹽乳糖發酵管若無菌生長、或有菌生長但不產酸產氣，判該管未檢出大腸菌群；若產酸產氣，應將發酵管中的培養物分別劃線接種于曙紅亞甲藍培養基或麥康凱瓊脂培養基的平板上，培養18~24小時。
若平板上無菌落生長，或生長的菌落與表2所列的菌落形態特征不符或為非革蘭陰性無芽孢桿菌，判該管未檢出大腸菌群；若平板上生長的菌落與表2所列的菌落形態特征相符或疑似，且為革蘭陰性無芽孢桿菌，應進行確證試驗。
表2 大腸菌群落形態特征
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培養基 菌落形態
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曙紅亞甲藍瓊脂 呈紫黑色、紫紅色、紅色或粉紅色，圓形，扁平
或稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤
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麥康凱瓊脂 鮮桃紅色或粉紅色，圓形，扁平
或稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤
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確證試驗 從上述分離平板上挑選4~5個疑似菌落，分別接種于乳糖發酵管中，培養24~48小時。若產酸產氣，判該膽鹽乳糖發酵管檢出大腸菌群，否則判未檢出大腸菌群。
根據大腸菌群的檢出管數，按表3報告1g或1ml供試品 中的大腸菌群數。
表3 可能的大腸菌群數表
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各供試品量的檢出結果 可能的大腸菌群數
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0.1g或 0.01g或 0.001g或
0.1ml 0.01ml 0.001ml
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+ + + ＞1000
+ + － 100 ＜N ＜1000
+ － － 10 ＜N ＜100
－ － － N ＜10
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注：+代表檢出大腸菌群； －代表未檢出大腸菌群。
（3）沙門菌（Salmonella） 取供試品10g或10ml，直接或處理后接種至適量（不少于200ml）的營養肉湯培養基中，用勻漿儀或其他適宜方法混勻，培養18~24小時。
取上述培養物1ml，接種于10ml四硫酸鈉亮綠培養基中，培養18~24小時后，分別劃線接種于膽鹽硫乳瓊脂（或沙門、志賀菌屬瓊脂）培養基和麥康凱瓊脂（或曙紅亞藍瓊脂）培養基的平板上，培養18~24小時（必要時延長至40~48小時）。若平板上無菌生長，或生長的菌落不同于表4所列的特征，判供試品未檢出沙門菌。
若平板上生長的菌落與表4所列的菌落形態特征相符或疑似，用接種針挑選2~3個菌落分別于三糖鐵瓊脂培養基高層斜面上進行斜面和高層穿刺接種，培養18~24小時，如斜面未見紅色、底層未見黃色；或斜面黃色、底層無黑色，判供試品未檢出沙門菌。否則，應取三糖鐵瓊脂培養基斜面的培養物進行適宜的生化試驗和血清凝集試驗，確認是否為沙門菌。
表4 沙門菌菌落形態特征
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培養基 菌 落 形 態
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膽鹽硫乳瓊脂 無色至淺橙色，半透明，菌落中心帶黑色
或全部黑色或無黑色
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沙門、志賀菌屬瓊脂 無色至淡紅色，半透明或不透明，菌落中
心有時帶黑褐色
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曙紅亞甲藍瓊脂 無色至淺橙色，透明或半透明，光滑濕潤
的圓形菌落
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麥康凱瓊脂 無色至淺橙色，透明或半透明，菌落中心
有時為暗色
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（4）銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa） 取供試液10ml（相當于供試品1g、1ml、10cm2），直接或處理后接種至適量（不少于100ml）的膽鹽乳糖培養基中，培養18~24小時。取上述培養物，劃線接種于溴化十六烷基**銨瓊脂培養基的平板上，培養18~24小時。
銅綠假單胞菌典型菌落呈扁平、無定形、周邊擴散、表面濕潤，灰白色，周圍時有藍綠色素擴散。如平板上無菌落生長或生長的菌落與上述菌落形態特征不符，判供試品未檢出銅綠假單胞菌。如平板上的菌落與上述菌落形態特征相符或疑似，應挑選2~3個菌落，分別接種于營養瓊脂培養基斜面上，培養18~24小時。取斜面培養物進行革蘭染色、鏡檢及氧化酶試驗。
氧化酶試驗 取潔凈濾紙片置于平皿內，用無菌玻棒取斜面培養物涂于濾紙片上，滴加新配置的1%二鹽酸二甲基對苯二胺試液，在30秒內培養物呈粉紅色并逐漸變為紫紅色為氧化酶試驗陽性，否則為陰性。
若斜面培養物為非革蘭陰性無芽孢桿菌或氧化酶試驗陰性，均判供試品未檢出銅綠假單胞菌。否則，應進行綠膿菌素試驗。
綠膿菌素（Pyocyanin)試驗 取斜面培養物接種于PDP瓊脂培養基斜面上，培養24小時，加三氯甲烷3~5ml至培養管中，攪碎培養基并充分振搖。靜置片刻，將三氯甲烷相移至另一試管中，加入1mol/l鹽酸試液約1ml,振搖后，靜置片刻，觀察。若鹽酸容易呈粉紅色，為綠膿菌素試驗陽性，否則為陰性。同時用未接種的PDP瓊脂培養基斜面同法作陰性對照，陰性對照試驗應呈陰性。
若上述疑似菌為革蘭陰性桿菌、氧化酶試驗陽性及綠膿菌素試驗陽性，判供試品檢出銅綠假單胞菌。若上述疑似菌為革蘭陰性桿菌、氧化酶試驗陽性及綠膿菌素試驗陰性，應繼續進行適宜的生化試驗，確認是否為銅綠假單胞菌。
(5)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 取供試液10ml（相當于供試品1g、1ml、10cm2），直接或處理后接種至適量（不少于100ml）亞碲酸鈉（鉀）肉湯（或營養肉湯）培養基中，培養18～24小時，必要時可延長至48小時。取上述培養物，劃線接種于卵黃氯化鈉瓊脂培養基或甘露醇氯化鈉瓊脂培養基的平板上，培養24~72小時。若平板上無菌落生長或生長的菌落不同于表5所列特征，判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
表5 金黃色葡萄球菌菌落形態特
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培養基 菌 落 形 態
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甘露醇氯化鈉瓊脂 金黃色，圓形凸起，邊緣整齊，外圍有黃色環，
菌落直徑0.7~1mm
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卵黃氯化鈉瓊脂 金黃色，圓形凸起，邊緣整齊，外圍有卵磷脂
分解的乳濁圈，菌落直徑1~2mm
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若平板上生長的菌落與表5所列的菌落特征相符或疑似，應挑選2~3個菌落，分別接種于營養瓊脂培養基斜面上，培養18~24小時。取營養瓊脂培養基的培養物進行革蘭染色，并接種于營養肉湯培養基中，培養18~24小時，作血漿凝固酶試驗。
血漿凝固酶試驗 取**小試管3支，各加入血漿和無菌水混合液（1：1）0.5ml，再分別加入可疑菌株的營養肉湯培養物（或由營養瓊脂培養基斜面培養物制備的濃菌懸液）0.5ml、金黃色葡萄球菌營養肉湯培養物（或由營養瓊脂培養基斜面培養物制備的濃菌懸液）0.5ml、營養肉湯或0.9%無菌氯化鈉溶液0.5ml，即為試驗管、陽性對照管和陰性對照管。將3管同時培養，3小時后開始觀察直至 24小時。陰性對照管的血漿應流動自如，陽性對照管血漿應凝固，若試驗管血漿凝固者為血漿凝固酶試驗陽性，否則為陰性。如陽性對照管或陰性對照管不符合規定時，應另制備血漿，重新試驗。
若上述疑似菌為非革蘭陽性球菌、血漿凝固酶試驗陰性，判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
（6）梭菌（Clostridium） 取供試液10ml（相當于供試品1g，1ml）2份，其中1份置80℃保溫10分鐘后迅速冷卻。上述2份供試液直接或處理后分別接種至100ml的庖肉培養基中。各培養基管在厭氧條件下培養72~96小時。如試驗管不出現渾濁、產氣、消化碎肉、臭氣等現象，判供試品未檢出梭菌；否則，應取上述培養物0.2ml，涂抹接種于含慶大霉素的哥倫比亞瓊脂培養基平板上，在厭氧條件下培養48~72小時。若平板上無菌落生長，判供試品未檢出梭菌；若平板上有菌落生長，應挑選2~3個菌落分別進行革蘭染色和過氧化氫酶試驗。
過氧化氫酶試驗 取上述平板上的菌落，置潔凈玻片上，滴加3%過氧化氫試液，若菌落表面有氣泡產生，為過氧化氫酶試驗陽性，否則為陰性。
若上述可疑菌落為革蘭陽性梭菌，有或無卵圓形或球形的芽孢，過氧化氫酶陰性，判供試品檢出梭菌，否則判供試品未檢出梭菌。
結果判斷
供試品檢出控制菌或其他致病菌時，按一次檢出結果為準，不再復試。
供試品的**數、霉菌和酵母菌數其中任何一項不符合該品種項下的規定，應從同一批樣品中隨機抽樣，獨立復試兩次，以3次結果的平均值報告菌數。
眼用制劑檢出霉菌和酵母菌數時，須以兩次復試結果均不得長菌，方可判供試品的霉菌和酵母菌數符合該品種項下的規定。
若供試品的**數、霉菌和酵母菌數及控制菌三項檢驗結果均符合該品種項下的規定，判供試品符合規定；若其中任何一項不符合該品種項下的規定，判供試品不符合規定。
稀釋液
稀釋液配制后，應采用驗證合格的**程序**。
1.PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液 照無菌檢查法（附錄 XII B）制備。
2.PH6.8無菌磷酸鹽緩沖液、PH7.6無菌磷酸鹽緩沖液 按緩沖液（附錄XV D）配制后，過濾，分裝，**。
如需要，可再上述稀釋液**前后或**后加入表面活性劑或中和劑等。
3.0.9%無菌氯化鈉溶液 取氯化鈉9.0g，加水溶解使成1000ml，過濾，分裝，**。
培養基及其制備方法
培養基可按以下**制備，也可使用按該**生產的符合要求的脫水培養基。配制后，應采用驗證合格的**程序**。
1.營養瓊脂培養基、營養肉湯培養基、硫乙醇酸鹽流體培養基、改良馬丁培養基及改良馬丁瓊脂培養基
照無菌檢查法（附錄 XIII B）制備。
2.玫瑰紅鈉瓊脂培養基
胨 5.0g 玫瑰紅鈉 0.0133g
葡萄糖 10.0g 瓊脂 14.0g
磷酸二氫鉀 1.0g 水 1000ml
硫酸鎂 0.5g
除葡萄糖、玫瑰紅鈉外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過，加入葡萄糖、玫瑰紅鈉，分裝，**。
3.酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基（YPD）
胨 10.0g 瓊脂 14.0g
酵母浸出粉 5.0g 水 1000ml
葡萄糖 20.0g
除葡萄糖外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過，加入葡萄糖，分裝，**。
4.膽鹽乳糖培養基（BL）
胨 20.0 磷酸二氫鉀 1.3g
乳糖 5.0g 牛膽鹽 2.0g
氯化鈉 5.0g （或去氧膽酸鈉） ?。?.5g）
磷酸氫二鉀 4.0g 水 1000ml
除乳糖、牛膽鹽（或去氧膽酸鈉）外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.4±0.2，煮沸，澄清，加入乳糖、牛膽鹽（或去氧膽酸鈉），分裝，**。
5.膽鹽乳糖發酵培養基
取未**的膽鹽乳糖培養基1000ml，加入0.04%溴甲酚紫指示液25ml，根據要求的用量分裝于含倒管的試管中。**。所用倒管的規格應保證產氣結果的觀察。
6.曙紅亞甲藍瓊脂培養基（EMB）
營養瓊脂培養基 100ml 曙紅鈉指示液 2ml
20%乳糖溶液 5ml 亞甲藍指示液 1.3~1.6ml
取營養瓊脂培養基，加熱溶化后，冷至60℃，按無菌操作加入**的其他3種溶液，搖勻，傾注平皿。
7.麥康凱瓊脂培養基（MacC）
胨 20.0g 1%中性紅指示液 3ml
乳糖 10.0g 瓊脂 14.0g
牛膽鹽 5.0g 水 1000ml
氯化鈉 5.0g
除乳糖、1%中性紅指示液、牛膽鹽及瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.2±0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入其余各成分，搖勻，分裝，**，冷至約60℃，傾注平皿。
8.4-甲基傘形酮葡萄苷酸（4-methylumbelliferyl-β-D-glu-curonide,MUG）培養基
胨 10.0g 磷酸二氫鉀（無水） 0.9g
硫酸錳 0.5mg 磷酸氫二鈉（無水） 6.2g
硫酸鋅 0.5mg 亞硫酸鈉 40mg
硫酸鎂 0.1g 去氧膽酸鈉 1.0g
氯化鈉 5.0g MUG 75mg
硫酸鈣 50mg 水 1000ml
除MUG外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.3±0.1，加入MUG，溶解，每管分裝5ml，**。
9.三糖鐵瓊脂培養基（TSI）
胨 20.0g 硫酸亞鐵 0.2g
牛肉浸出粉 5.0g 硫代硫酸鈉 0.2g
乳糖 10.0g 0.2%酚磺酞指示液 12.5ml
蔗糖 10.0g 瓊脂 12.0g
葡萄糖 1.0g 水 1000ml
氯化鈉 5.0g
除三種糖、0.2%酚磺酞指示液、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后7.3±0.1，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入其余各成分，搖勻，分裝，**，制成高底層（2~3cm）短斜面。
10.四硫磺酸鈉亮綠培養基（TTB）
胨 5.0g 硫代硫酸鈉 30.0g
牛膽鹽 1.0g 水 1000ml
碳酸鈣 10.0g
取上述成分，混合，微溫溶解，**。
臨用前，取上述培養基，每10ml加入碘試液0.2ml 和亮綠試液0.1ml，混勻。
11.沙門、志賀菌屬瓊脂培養基（SS）
胨 5.0g 硫代硫酸鈉 8.5g
牛肉浸出粉 5.0g 中性紅指示液 2.5 ml
乳糖 10.0g 亮綠試液 0.33ml
牛膽鹽 8.5g 瓊脂 16.0g
枸櫞酸鈉 8.5g 水 1000ml
枸櫞酸鐵銨 1.0 g
除乳糖、中性紅指示液、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.2±0.1，濾過，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入其余各成分，搖勻，**，冷至60℃，傾注平皿。
12.膽鹽硫乳瓊脂培養基（DHL）
胨 20.0g 枸櫞酸鈉 1.0g
牛肉浸出粉 3.0g 枸櫞酸鐵銨 1.0g
乳糖 10.0g 中性紅指示液 3ml
蔗糖 10.0g 瓊脂 16.0g
去氧膽酸鈉 1.0g 水 1000ml
硫代硫酸鈉 2.3 g
除糖、指示液及瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后
為7.2±0.1，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入其余成分，搖勻，冷至60℃，傾注平皿。
13.溴化十六烷基**銨瓊脂培養基
胨 10.0g 溴化十六烷基**銨 0.3g
牛肉浸出粉 3.0g 瓊脂 14.0g
氯化鈉 5.0g 水 1000ml
除瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.5±0.1，加入瓊脂，加熱溶化后，分裝，**，冷至60℃，傾注平皿。
14.亞蹄酸鹽肉湯培養基
臨用前，取**的營養肉湯培養基，每100ml 中加入新配制的1%亞碲酸鈉（鉀）試液0.2ml，混勻，即得。
15.卵黃氯化鈉瓊脂培養基
胨 6.0g 10%氯化鈉卵黃液 100ml
牛肉浸出粉 1.8g 瓊脂 14.0g
氯化鈉 30.0g 水 650ml
除10%氯化鈉卵黃液外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.6±0.1，**，待冷至約60℃，以無菌操作加入10%氯化鈉卵黃液，充分振搖，傾注平皿。
10%氯化鈉卵黃液的制備 取新鮮雞蛋1個，以免菌操作取出卵黃，放入10%無菌氯化鈉溶液100ml，充分振搖即得。
16.甘露醇氯化鈉瓊脂培養基
胨 10.0g 酚磺酞指示液 2.5ml
牛肉浸出粉 1.0g 瓊脂 14.0g
甘露醇 10.0g 水 1000ml
氯化鈉 75.0g
除甘露醇、酚酞磺指示液及瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.4±0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，濾過，分裝，**，冷至60℃，傾注平皿。
17.乳糖發酵培養基
胨 20.0g 乳糖 10.0g
0.04%溴甲酚紫 水 1000ml
指示液 25ml
除0.04%溴甲酚紫指示液外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.2±0.2，加入指示液，分裝于含倒管的小試管中，每管3ml。**。
18.綠膿菌素（pyocyanin)測定用培養基（PDP瓊脂培養基）
胨 20.0g 甘油 10ml
氯化鎂（無水） 1.4g 瓊脂 14.0g
硫酸鉀（無水） 10.0g 水 1000ml
取胨、氯化鎂、硫酸鉀和水混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.3±0.1，加入甘油及瓊脂，加熱溶化，混勻，分裝于試管，**，置成斜面。
19.庖肉培養基
牛肉碎塊的制備 取新鮮牛肉，除去脂肪和筋腱，加蒸餾水煮沸約10分鐘，切成約5mm3的小塊，稱重，按1：3（肉：水）加蒸餾水，置4~10℃浸18~20小時后，煮沸1小時，用白布過濾（濾液即為1：3牛肉浸液），肉渣用自來水漂洗2次，然后加入適量氫氧化鈉溶液，攪拌，使PH在8.4左右，浸泡過夜，次日傾去上層水，用蒸餾水沖洗2~3次，放在紗布上，自動瀝干（不要擠壓）。將肉渣鋪在搪瓷盤上，**，于80~100℃烘干，篩去碎屑，裝瓶，保持干燥，備用。
庖肉培養基的制備 將上述碎肉塊裝入合適的容器中，再加入營養肉湯培養基，碎肉的量為1.5%，調節PH使**后為7.3±0.1。**。
20.哥倫比亞瓊脂培養基
酪蛋白胰酶消化物 10.0g 肉胃酶消化物 5.0g
心胰酶消化物 3.0g 酵母浸出粉 5.0g
玉米淀粉 1.0g 氯化鈉 5.0g
瓊脂 15.0g 水 1000ml
除瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節PH值使**后為7.3±0.2，加入瓊脂，加熱溶化，濾過，分裝，**，冷至45~50℃，加入相當于20mg慶大霉素的無菌硫酸慶大霉素，混勻，傾注平皿。
試液
十四烷酸異丙酯 Isopropyl Myristate ［C17H34O2=270.46］
本品為無色液體。溶于乙醇、乙醚、丙酮、三氯甲烷或甲苯，不溶于水、甘油或丙二醇。約208℃分解。
二鹽酸二甲基對苯二胺 N,N-dimethyl-p-phenylenedi-amine Dihydrochloride［C8H12N2.3HCL=209.12］
本品為白色或灰白色結晶性粉末；置空氣中色漸變暗；易吸潮。在水或乙醇中溶解。
溴化十六烷基**銨 Cetyl Trimethylammonium Bromide［C19H42BrN=364.46］
本品為白色結晶。在水中溶解，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。
中性紅Neutral Red ［C15H17N4Cl=288.78］
本品為深綠色或宗黑色粉末。在水或乙醇中溶解。
牛肉浸出粉 Beef Extract Powder
本品為米黃色粉末，在水中溶解。
牛膽鹽 Ox Bile Salt
本品為淡黃色或黃棕色粉末，味苦而甜，具吸濕性。在水或醇中易溶。
甘露醇 Mannitol ［C6H14O6=182.17］
本品為白色結晶；味甜。在水中溶解，在乙醇中微溶。
4-甲基傘形酮葡萄苷酸 4-Methylumbelliferyl-β-D-Glu-curonide,MUG［C18H16O9=376.3］
本品為白色針狀結晶。在水、乙醇或乙醚中溶解。在稀氫氧化鈉溶液中分解。
去氧膽酸鈉 Sodium Deoxycholate ［C24H39NaO4=414.56］
本品為白色結晶性粉末，味苦。易溶于水，微溶于醇，不溶于醚。
亞碲酸鈉 Sodium Tellurite ［Na2TeO3=221.58］
本品為白色粉末。在熱水中易溶，在水中微溶。
玫瑰紅鈉（四氯四碘熒光素鈉） Rose Bengal Sodium Salt ［C20H2Cl4I4Na2O5=1017.6］
本品為棕紅色粉末。在水中溶解，溶液呈紫色，無熒光；在硫酸中溶解，溶液為棕色。
單硬脂酸甘油酯 Glycerol Monostearte ［C21H42O4=358.56］
本品為白色或黃色臘狀。在熱有機溶劑或礦物油中溶解，在水中不溶，但與水能乳化。
枸櫞酸鈉 Sodium Citrate ［C6H5Na3O7.2H2O=294.10］
本品為白色結晶或粉末。在水中易溶，在乙醇中不溶。
枸櫞酸鐵銨 Ammonium Ferric Citrate ［C12H22FeN3O14=488.16］
本品為棕紅色或綠色鱗片或粉末，易溶解，見光易還原成亞鐵。在水中溶解，在醇或醚中不溶。
胰蛋白胨 Tryptone
本品為米黃色粉末。在水中溶解。
硫酸鋅 Zinc Sufate ［ZnSO4.7H2O=287.56］
本品為白色結晶、顆?；蚍勰Ｔ谒幸兹?，在甘油中溶解，在乙醇中微溶。
硫酸錳 Manganese Sulfate ［MnSO4.H2O=169.02］
本品為粉紅色結晶。在水中溶解，在乙醇中不溶。
酪蛋白胰酶消化物（胰酪胨或酪胨） Pancreatic Digest of Casein
本品為黃色或淺黃色顆粒。以干酪素為原料經胰酶水解、活性炭脫色處理、精制而成。
試 液
二鹽酸二甲基對苯二胺試液 取二鹽酸二甲基對苯二胺0.1g，加水10ml,即得。需新鮮少量配制，于冷處避光保存，如試液變成紅褐色，不可使用。
亞碲酸鈉（鉀）試液 取亞碲酸鈉（鉀）0.1g ，加新鮮煮沸后冷至50℃的水10ml使溶解。
玫瑰紅鈉試液 取玫瑰紅鈉0.1g，加水使溶解成75ml。
亮綠試液 取亮綠0.1g，加水100ml 使溶解。
鹽酸試液 取鹽酸8.4 ml，加水使稀釋成100 ml 。
靛基質試液 取對二甲氨基甲醛5.0g，加入戊醇（或丁醇）75ml，充分振搖，使完全溶解后，再取濃鹽酸25ml徐徐滴入，邊加邊振搖，以免驟熱導致溶液色澤變深，或取對二甲氨基苯甲醛1.0g，加入95%乙醇95 ml，充分振搖，使完全溶解后，取鹽酸20ml徐徐滴入。
碘試液 取碘6g與碘化鉀5g，加水20ml使溶解。
過氧化氫試液 取濃過氧化氫溶液（30%），加水稀釋 成3%的溶液，臨用時配制。
指示液
中性紅指示液 取中性紅1.0g，研細，加95%乙醇60ml使溶解，再加水至100ml。
變色范圍PH6.8~8.0（紅→黃）。
亞甲藍指示液 取亞甲藍0.5g，加水使溶解成1000ml。
酚磺酞指示液 取酚磺酞1.0g，加1mol/L氫氧化鈉溶液2.82ml，使溶解，再加水至100ml。
變色范圍PH6.8~8.4（黃→紅）。
溴甲酚紫指示液 取溴甲酚紫1.6g，加95%乙醇使溶解成100ml。
變色范圍PH5.2~6.8（黃→紫）。
曙紅鈉指示液 取曙紅鈉2.0g，加水使溶解成100ml。
微生物限度標準
非無菌藥品的微生物限度標準是基于藥品的給藥途徑和對患者健康潛在的危害而制訂的。藥品的生產、貯存、銷售過程中的檢驗，中藥提取物及輔料的檢驗，新藥標準制訂，進口藥品標準復核，考察藥品質量及仲裁等，除另有規定外，其微生物限度均以本標準為依據。
1.制劑通則、品種項下要求無菌的制劑及標示無菌的制劑 應符合無菌檢查法規定。
2.口服給藥制劑
2.1 不含藥材原粉的制劑
**數 每1g不得過1000個。每1ml 不得過100個。
霉菌和酵母菌數 每1g或1ml 不得過100個。
大腸埃希菌 每1g或1ml 不得檢出。
2.2 含藥材原粉的制劑
**數 每1g不得過10 000個（丸劑每1g不得過30000個）。每1ml不得過500個。
霉菌數和酵母菌數 每1g或1ml不得過100個。
大腸埃希菌 每1g或1ml不得檢出。
大腸菌群 每1g應小于100個。每1ml應小于10個。
2.3 含豆豉、神曲等發酵成分的制劑
**數 每1g不得過100 000個。每1ml不得過1000個。
霉菌和酵母菌數 每1g不得過500個。每1ml不得過100個。
大腸埃希菌 每1g或1ml不得檢出。
大腸菌群 每1g應小于100個。每1ml應小于10個。
3.局部給藥制劑
3.1 用于手術、**及嚴重創傷的局部給藥制劑 應符合無菌檢查法規定。
3.2 用于表皮或黏膜不完整的含藥材原粉的局部給藥制劑
**數 每1g或10cm2不得過1000個。每1ml不得過100個。
霉菌數和酵母菌數 每1g、1ml或10cm2 不得過100個。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌 每1g、1ml或10cm2 不得檢出。
3.3 用于表皮或黏膜完整的含藥材原粉的局部給藥制劑
**數 每1g或10cm2 不得過10 000個。每1ml不得過100個。
霉菌數和酵母菌數 每1g、1ml或10cm2 不得過100個。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌 每1g、1ml或10cm2 不得檢出。
3.4眼部給藥制劑
**數 每1g或1ml不得過10個。
霉菌數和酵母菌數 每1g、1ml或10cm2 不得檢出。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌每1g、1ml 不得檢出。
3.5耳、鼻及呼吸道吸入給藥制劑
**數 每1g、1ml或10cm2不得過100個。
霉菌和酵母菌數 每1g、1ml或10cm2 不得過10個。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌 每1g、1ml或10cm2 不得檢出。
大腸埃希菌 鼻及呼吸道給藥的制劑 每1g、1ml或10cm2不得檢出。
3.6 **、尿道給藥制劑
**數 每1g或1ml 不得過100個。
霉菌數和酵母菌數 每1g或1ml 應小于10個。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌 每1g或1ml 不得檢出。
3.7 直腸給藥制劑
**數 每1g不得過1000個。每1ml 不得過100個。
霉菌和酵母菌數 每1g或1ml不得過100個。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌 每1g或1ml 不得檢出。
3.8 其他局部給藥制劑
**數 每1g、1ml或10cm2 不得過100個。
霉菌和酵母菌數 每1g、1ml或10cm2不得過100個。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌 每1g、1ml或10cm2 不得檢出。
4.含動物組織（包括提取物）及動物類原藥材粉（蜂蜜、王漿、動物角、阿膠除外）的口服給藥制劑 每10g或10 ml還不得檢出沙門菌。
5.有兼用途徑的制劑 應符合各給藥途徑的標準。
6.霉變、長螨者 以不合格論。
7.中藥提取物及輔料 參照相應制劑的微生物限度標準執行。
