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生物樣品處理方式方法
生物樣品處理方式方法
                                                                                                             ------北京星越生物科技有限公司
      破碎是進(jìn)行隔離或定性RNA、DNA、蛋白質(zhì)和分析物的初期步驟。化學(xué)性和機(jī)械性（物理性）破碎法都可使用，但較多樣品類型傾向使用化學(xué)性方法(例如：大腸桿菌及培養(yǎng)細(xì)胞)。然而，許多微生物、未受破壞之組織、固體標(biāo)本如種子、或大型樣品則不適用于化學(xué)性方法。針對(duì)這類有彈性的樣品，便會(huì)使用根據(jù)磨碎、剪切、敲打和振蕩為基礎(chǔ)的機(jī)械/物理性方法。機(jī)械/物理性破碎方法有機(jī)械式均質(zhì)機(jī)、手動(dòng)均質(zhì)、研磨、超聲波破碎、混合碾磨機(jī)、渦旋機(jī)皆為常見的工具。這些樣品處理的方法雖然每日廣泛的使用，但未必被明確的了解。如同其它實(shí)驗(yàn)室內(nèi)廣泛使用的方法，這些方法經(jīng)過(guò)研究人員的傳承，很少去解釋過(guò)程本身的意思。破碎和均質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響可能很小，但同時(shí)，所選擇的工具與方法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦可能有很大的影響。
        可能的話，化學(xué)方法可能是優(yōu)選的方法，例如:使用SDS裂解E. Coli，得到分離的質(zhì)體，但此方法亦可能導(dǎo)致裂解液中有不需要的分子。化學(xué)方法對(duì)分離核酸是有效的，但使用去除劑和離液劑(detergents and chaotropes)使蛋白質(zhì)變性(denature)。相同的問題也發(fā)生在蛋白質(zhì)純化時(shí)，加入裂解酵素后，之后必須移除裂解酵素。若加入化學(xué)物質(zhì)是不切實(shí)際且無(wú)法有效運(yùn)作的話，則另一個(gè)方法便是使用機(jī)械式和物理式的破碎。
        機(jī)械/物理方式的破碎樣品包含研磨、剪切、敲打和震動(dòng)。有時(shí)候，很難分辨不同力量的差別。為了簡(jiǎn)單起見，我們以使用的工具來(lái)分類。如超聲波破碎儀、高壓破碎儀、組織研磨機(jī)、組織攪拌機(jī)、機(jī)械式均質(zhì)機(jī)、渦旋震蕩器等。在這些工具和方法中，超聲破破碎和高壓破碎是目前比較先進(jìn)方法，使用超聲破碎和高壓破碎進(jìn)行樣品處理既避免了化學(xué)方**摻入不必要分子的不足，同時(shí)又能達(dá)到理想的破碎效果。事實(shí)上，美國(guó)BRANSON的超聲波破碎儀在生物細(xì)胞破碎樣品處理領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，受到很多專家學(xué)者的好評(píng)。
       理想的破碎**是使用一個(gè)或多個(gè)方法來(lái)達(dá)到需要的結(jié)果。實(shí)際上分離亞細(xì)胞碎片可能**步是使用剪刀切掉組織、接著使用手持式均質(zhì)機(jī)研磨，*后使用超聲波破碎儀分離。若任何一個(gè)步驟省略，將得到較低的結(jié)果。
 
 

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