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樣品前處理方式--Gringing(研磨)及優(yōu)缺點
樣品前處理
方式--Gringing(研磨)及優(yōu)缺點
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北京星越
生物科技有限公司
BRANSON
(必能信)超聲破碎
產(chǎn)品
硏砵和杵是研磨*為人所知的工具,但仍有其它工具可用在研磨來進行
樣品前處理
。例如谷類加工廠、咖啡研磨機以及其它實驗室儀器,包括渦旋機和玻璃均質(zhì)機。研磨是將樣品用兩個硬的表面夾在中間,兩個硬的表面互相摩擦。研磨可使樣品撕裂、
破碎
,如同剪切,但不同的是,研磨會讓均質(zhì)機與樣品直接接觸,但
超聲波破碎儀
就不同了。
不同的研磨方式可用于濕的、干燥或冷凍的
樣品前處理
。將相對較軟的樣品放在兩個較硬、互相摩擦的表面,會磨損樣品。利用適當?shù)姆椒ㄅc研磨表面,達到
破碎
效果,可磨成微粒。
研磨主要的特征是摩擦力會產(chǎn)生熱,隨著時間而更加明顯,但
超聲波破碎儀
效果不明顯。因此,使用研磨破壞樣品必須考慮分析物對熱的容忍度,否則無法達到
樣品前處理
的要求。通常樣品在研磨前會先冷凍,特別是利用液態(tài)氮,可冷卻樣品和均質(zhì)機。這種低溫研磨使樣品變脆且容易斷裂,但它也保留了耐熱性差的被分析物或分離出來后會迅速降解的樣品,如RNA。
*古老用來研磨的工具是硏砵和杵,目前在實驗室*常見的研磨工具仍然是硏砵和杵,但硏砵和杵不是研磨**的工具。許多研究人員使用研磨珠和渦旋機用于裂解微生物,更大的硏磨珠用于組織樣品。各種配置的桌上式漩渦混合器可用于微米大小的磨珠裂解**、酵母菌和霉菌。更大的組織樣品可放于試管內(nèi),使用較大的不銹鋼磨珠破壞。
渦旋機,可用于破壞細胞,但與下述其它方法相比,效果較差。一些玻璃組織均質(zhì)器使用磨削力與剪切力有效的破壞培養(yǎng)細胞與組織。選用
超聲波破碎儀
來進行
樣品前處理
效果可能更好
杵與硏砵
杵與研砵仍是普遍用來做樣品均質(zhì)的器具。在生命科學(xué)實驗室中,*常用來研磨用液態(tài)氮冷凍的組織(見下文),然而,于室溫下研磨固體,這類器具仍是不可或缺的。對于樣品偶爾需要研磨,使用杵和研砵是可行的,但若需要大量產(chǎn)量,則攪拌機(mixer mills)這類的工具是較為實際的。
優(yōu)點:
杵和硏砵是很簡易使用的工具,且價格便宜。使用干磨,達到
破碎
效果,產(chǎn)生非常小的顆粒。
限制:
杵和硏砵的產(chǎn)量很低。另外也要考慮在研磨的過程中可能產(chǎn)生粉塵污染樣品。雖然杵和硏砵都很堅固,但許多是用玻璃或瓷器制成,落下可能碎掉或產(chǎn)生裂縫。
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樣品前處理方式--使用冷凍研磨機于少量樣品研磨及優(yōu)缺點
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確定樣品處理方法的原則與依據(jù)
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