核酸分為脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),其中RNA又可以根據(jù)功能的不同分為核糖體RNA(rRNA),信使RNA(mRNA)和轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)。DNA主要集中在細(xì)胞核內(nèi),線粒體和葉綠體中,而RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中。提取純化是一個以及十分普及的應(yīng)用。超聲法提取已經(jīng)得到了充分的肯定。
核酸提取純化方法一般分為:
1、酚/氯仿抽提法
2、醇沉淀法
3、層析柱法
4、熱裂解堿法
5、煮沸裂解法
6、納米磁珠法
7、超聲法(包括超聲波破碎儀與超聲波清洗機(jī)兩種應(yīng)用方式)
目前超聲法是普遍使用的方法,在總RNA提取,miRNA提取,基因組DNA提取,質(zhì)粒抽提等不同提取方式上均可完成。其中超聲波破碎儀有單個贗本速度*快的優(yōu)勢,超聲波清洗機(jī)則適用于多個樣本同時處理的優(yōu)勢。
超聲法優(yōu)勢:
1、
耗時短,一般幾分鐘即可完成
2、
控溫方便,冰浴即可完成4℃控溫
3、
污染小,可直接在容器內(nèi)(如離心管,EP管等)單獨完成,不與外界接觸
4、
方便清潔,樣品接觸部分的配件可高溫**,且耐酸、耐堿等不同方式處理
樣品前處理階段效果好壞,直接決定了后續(xù)分析測試的結(jié)果,選擇一種更適合自己的處理方式,可有效降低工作時間、樣品損耗,更佳有利于實驗進(jìn)程。
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